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  • 中藥分析檢測

    ·中藥分析檢測簡述

    北京清析技術研究院提供中藥配方、有效成分、礦物質、重金屬、理化指標、真菌毒素、農藥殘留、微生物等分析檢測服務


    ·中藥分析檢測項目

    類別詳細項目
    配方組成藥方的各種藥物名稱及配比
    有效成分植物有效成分:黃酮類、揮發油類、甾體及苷類、生物堿類、糖類等。

    動物藥有效成分:膽汁酸、?;撬?、麝香酮、麝香醇等。
    礦物質及重金屬人體必須礦物質:鈉(Na)、鉀(K)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、鐵(Fe)、鋅(Zn)、磷(P);

    有害重金屬分析:砷(As)、鉛(Pb)、鎘(Cd)、汞(Hg)、銅(Cu)等。
    常規理化水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物含量、雜質和亞硫酸鹽殘留量等。
    真菌毒素黃曲霉毒素(Aflatoxin B1、B2、G1、G2)、赭曲霉毒素及霉菌毒素等。
    農藥殘留有機氯農藥殘留、有機磷農藥殘留、擬除蟲菊酯類農藥殘留等。
    獸藥殘留磺胺類藥物、沙星類、四環素類、硝基呋喃類等。
    微生物檢測菌落總數、霉菌及酵母菌、大腸菌群、銅綠假單胞菌、沙門氏菌、金葡、白念等。
    其他微生物限度檢測、無菌試驗、抑菌效果檢測、中藥指紋圖譜等。


    · 中藥分析檢測方法

    一、實驗目的
    使用飛行時間高分辨質譜搜索補藥藥物中中西藥成分,分析補藥藥物中西藥組成成分。

    二、供試品制備方法
    取“樣品”中藥液體于2ml離心管中,放入高速離心機中13000r/min離心10min,過0.22um微孔濾膜后裝入1.5ml自動進樣瓶內,得到補藥提取物樣品。同樣條件得到空白對照樣品。將樣品放入4℃冰箱保存,在分析前取出(保存時間不能超過24h)。

    三、色譜條件
    色譜儀器為:島津LC-30A。色譜柱為Unitary C18(2.8μm,2.1mm*150mm);柱溫為30℃;流速為0.3ml/min;進樣量為2μl;流動相采用乙腈-0.1%甲酸水溶液的梯度洗脫程序,具體見表1。


    表1 流動相梯度洗脫程序

    Time(min)A(0.1%甲酸水)B(乙腈)
    0.01955
    156040
    275100
    315100
    31.5955
    35stop


    四、色譜條件
    質譜儀器為AB Sciex Triple TOF 5600+。
    離子化模式為電噴霧正離子模式,離子源電壓分別為 5500V,離子源溫度為500℃,去簇電壓(DP)分別為 100 V,碰撞能量(CE)分別為 35 eV,碰撞能量擴展(CES)分別為15eV。霧化氣體為氮氣,輔助氣 1 為 50 PS I,輔助氣 2 為 50 PSI,氣簾氣為 40 PSI。一級質譜母離子掃描范圍為 50~1000,IDA 設置響應值超過100 cps的6個最高峰進行二級質譜掃描,子離子掃描范圍為50~1000,開啟動態背景扣除(DBS)。
    離子化模式為電噴霧負離子模式,離子源電壓分別為-4500V,離子源溫度為500℃,去簇電壓(DP)分別為 100 V,碰撞能量(CE)分別為 -35 eV,碰撞能量擴展(CES)分別為15eV。霧化氣體為氮氣,輔助氣 1 為 50 PS I,輔助氣 2 為 50 PSI,氣簾氣為40 PSI。一級質譜母離子掃描范圍為50~1000,IDA 設置響應值超過100 cps的6個最高峰進行二級質譜掃描,子離子掃描范圍為50~1000,開啟動態背景扣除(DBS)。

    五、實驗結果 


    圖一:“樣品”中藥提取物正離子模式下與空白對照總離子流圖

    圖二:“樣品” 中藥提取物負離子模式下與空白對照總離子流圖


     
    本實驗查找了人參、靈芝、黨參、三七、甘草、山藥、熟地、白芍、枸杞、當歸、麝香、黃芪、白術、冰片、陳皮、黃連、葛根、共17種中藥、維生素、氨基酸及西藥成分,建立起412種成分數據庫,采用飛行時間高分辨質譜對“樣品”中藥提取物定性檢測,得出結果如下:

    5.1 樣品中藥活性成分分析
    5.1.1通過無目標物搜索,從質譜圖中找到響應值超過500的成分共6578種;
    5.1.2通過數據庫中藥活性成分目標物搜索:

    (1)中藥活性成分檢測
    補藥中藥正、負離子模式下共檢測到113種活性成分,其中質譜響應強度大于10000的活性成分共有32種,按質譜響應強度排序分別為:葛根素、櫻黃素、芫花素、毛蕊異黃酮、鷹嘴豆芽素A、芒柄花苷、桉葉醇、茅術醇、β-欖香醇、毛蕊花糖苷、6-O-E麥角甾苷、白術內酯、(+)-丹芝酸 D、京尼平苷酸、沒食子酸乙酯、8-表-馬錢子苷酸、靈芝醛 B、齊墩果酮酸、尿嘧啶核苷、白術三醇、甘草苷、甜菜堿、檸檬酸單甲脂、2-甲氨基苯酸甲酯、芒柄花素、異鼠李素、5-羥基-6,7,8,3,4-五甲氧基黃酮、7-羥基-3,5,6,3,4-五甲氧基黃酮、5-去甲川陳皮素、刺囊酸、闊葉合歡萜酸、靈芝酸 L

    (2)中藥粉末組方分析
    將中藥中檢測到的中藥活性成分歸類,統計檢測的中藥活性成分在數據庫中的占比,從而判斷補藥中藥組方。


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